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MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介

MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:DAPI溶液(5mg/ml)DAPI染色液Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料Hoechst 33258染色液Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料Hoechst 33342染色液活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)細(xì)胞活力檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)碘化丙啶Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

更新時(shí)間:2022-06-20
訪問次數(shù):6067

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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

中文名稱:MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒

英文名稱:MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格:500次
產(chǎn)品貨號(hào):LZ-01X6321

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

MTS是一種新型甲臜化合物,和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細(xì)胞里的線粒體脫氫酶降解而產(chǎn)生棕黃色水溶性的甲臜,通過測定甲臜的光譜吸收,進(jìn)而可以測定細(xì)胞的增殖情況。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.本試劑盒是單溶液式細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑,主要成分包含MTS和一個(gè)電子耦合試劑,溶液的穩(wěn)定性強(qiáng),反應(yīng)的靈敏度高。
2.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
3.無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
4.與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
5.操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃避光保存,有效期半年。
使用效果:
96孔板中加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí),加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,每孔中加入10μL的MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時(shí)。490nm波長檢測光密度。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

    2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

    5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

7.jpg

培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B因子(BF)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光)    

TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)    

Caspase 1 活性檢測試劑盒    

Caspase 2 活性檢測試劑盒    

Caspase 3 活性檢測試劑盒    

Caspase 4 活性檢測試劑盒    

Caspase 6 活性檢測試劑盒    

Caspase 8 活性檢測試劑盒    

Caspase 9 活性檢測試劑盒    

Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)    

Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)    

線粒體膜電位檢測試劑盒    

羅丹明123    

CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒    

細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)    

Ad-GFP-LC3B    

Ad-mCherry-GFP-LC3B    

DAPI溶液(5mg/ml)    

DAPI染色液    

Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料    

MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒Hoechst 33258染色液    

Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料    

Hoechst 33342染色液    

活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)    

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

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